A new immunochemistry process that transform a non-immunogenic crotamine-like antigen from rattlesnake (Crotalus durissus cumanensis) venom, in immunogenic to produce anti-crotamine-like antibodies
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Date
2021Palabras Clave
Crotalus durissus cumanensis, Crotaminasimilar, Glutaraldehido, Anticuerpo policlonal, Polimerización, VenenoCrotalus durissus cumanensis, Crotamine-like, Glutaraldehyde, Polyclonal antibody, Polymerisation, Venom
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The making of antibodies in animals can be demanding due
to that several antigens, mostly of low molecular masses,
provoke imperceptible immune response or are even totally nonimmunogenic.
The transformation of non-immunogenic molecules
into effective antigens represent an important immunological
tasks. The crotamine from the rattlesnake Crotalus durissus
cumanensis snake venom was purified by a Mono S HR 10/10
chromatography column and used to immunise C57/B mice, after
to be polymerised with glutaraldehyde. The murine polyclonal
antibodies directed against native crotamine-like (NCL) treated
with glutaraldehyde and their product crotamine-like polymer
(CLP) were generated by immunisation injecting CLP via lymph
node cells. These antibodies were capable of detecting CLP
in an enzyme-linked immunosorbent assay. The SDS-PAGE
of NCL and CLP showed bands of molecular masses ~ 3 kDa
and ~18 kDa, respectively. These results offer evidence that the
polyclonal antibodies recognise specific putative original and
post-polymerisation epitopes on the CLP molecule, which were
maintained following the process of polymerisation. The results
are discussed in relation to the preservation of a functional postpolymerisation
epitopes on CLP.
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Otros Títulos | Un nuevo proceso inmunoquímico que convierte crotamina del veneno de serpiente de Cascabel (Crotalus durissus cumanensis), un antígeno no-inmunogénico, en inmunogénico para producir anticuerpos anti-crotamina |
Correo Electrónico | rodriguezacosta1946@yahoo.es |
Editor | SaberULA |
ISSN | 0798-2259 |
ISSN Electrónico | 2477-944X |
Resumen en otro Idioma | La producción de anticuerpos en animales puede ser una actividad ardua, debido a que muchos antígenos, principalmente los de baja masa molecular, provocan una respuesta inmune imperceptible o aún son totalmente no-inmunogénicos. La transformación de una molécula no inmunogénica, en un antígeno efectivo representa un importante reto inmunológico. La crotamina obtenida del veneno de la serpiente de cascabel (Crotalus durissus cumanensis) fue purificada a través de una columna de cromatografía Mono S HR 10/10 (Biorad, EUA) y usada para inmunizar ratones de la cepa C57/B, luego de ser polimerizada con glutaraldehido. Los anticuerpos policlonales dirigidos contra la crotamina nativa tratada con glutaraldehido, y su producto el polímero obtenido de la crotamina (CLP) se lograron mediante inmunización vía ganglios linfáticos con polímeros de CLP. Esos anticuerpos policlonales fueron capaces de detectar el CLP, en un ensayo de ELISA. Los perfiles de migración (SDS-PAGE) de la crotamina nativa y la CLP mostraron bandas de masa molecular ~ 3 kDa y ~18 kDa, respectivamente. Estos resultados ofrecen evidencia de que los anticuerpos policlonales reconocen epítopes específicos originales y posteriores a la polimerización en la molécula de CLP, que se mantuvieron luego del proceso de polimerización. Los efectos se discuten en relación con la preservación de epítopes funcionales post-polimerización en CLP. |
Colación | 173-179 |
País | Venezuela |
Institución | Universidad del Zulia (LUZ) Universidad de Los Andes (ULA) |
Publicación Electrónica | Revista Científica |
Sección | Revista Científica: Artículos |